慕尼黑大學(xué)的研究人員開發(fā)了一種方法來確定使用超分辨率熒光顯微鏡標記目標蛋白的可靠性。
現(xiàn)代顯微鏡技術(shù)使得以驚人的細節(jié)檢查細胞的內(nèi)部運作成為可能。 “我們現(xiàn)在可以在顯微鏡下觀察單個蛋白質(zhì)的排列和相互作用，”慕尼黑大學(xué)生命分子物理學(xué)主席兼 MPI 生物化學(xué)馬克斯·普朗克研究員 Ralf Jungmann 教授說。
這位生物物理學(xué)家的團隊最近開發(fā)了革命性的RESI(順序成像分辨率增強)方法。該技術(shù)可用于將熒光顯微鏡的分辨率提高至埃級——遠低于光的經(jīng)典衍射極限。研究人員將 DNA 標記分子精確地附著在他們想要更好地理解的分子上，對此至關(guān)重要。
Jungmann 的團隊現(xiàn)已在《自然方法》雜志上提出了一項技術(shù)，可用于量化生物標記分子與目標蛋白質(zhì)的結(jié)合程度。 “如果你想做出定量可靠的陳述，這絕對是至關(guān)重要的，”物理學(xué)家解釋道。
如果知道標記效率，就可以通過這種方式進行空間分辨蛋白質(zhì)組學(xué)。這使您不僅可以了解單個蛋白質(zhì)在細胞中的作用，還可以了解它們存在的程度以及它們的數(shù)量和行為在某些情況下如何變化。 “但這只有在我們能夠評估標簽效果的情況下才有可能。”這是因為只有標記的蛋白質(zhì)在顯微鏡下才會發(fā)出閃光，從而變得可見。
Jungmann 團隊開發(fā)的方法通過向目標蛋白添加參考生物標志物使這種評估成為可能。該標記在顯微鏡檢查過程中以不同的顏色“發(fā)光”，因此成功標記的蛋白質(zhì)以兩種顏色出現(xiàn)。
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