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轉(zhuǎn)基因技術(shù)的定義將人工分離和修飾過的基因?qū)氲缴矬w基因組中,由于導(dǎo)入基因的表達(dá),引起生物體的性狀的可遺傳的修飾,這一技術(shù)稱之為轉(zhuǎn)基因技術(shù)。
人們常說的"遺傳工程"、"基因工程"、"遺傳轉(zhuǎn)化"均為轉(zhuǎn)基因的同義詞。
經(jīng)轉(zhuǎn)基因技術(shù)修飾的生物體在媒體上常被稱為"遺傳修飾過的生物體"(Genetically modified organism,簡稱GMO)。
幾種常用的植物轉(zhuǎn)基因方法遺傳轉(zhuǎn)化的方法按其是否需要通過組織培養(yǎng)、再生植株可分成兩大類,第一類需要通過組織培養(yǎng)再生植株,常用的方法有農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化法、基因槍法;另一類方法不需要通過組織培養(yǎng),目前比較成熟的主要有花粉管通道法。
1.農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化法農(nóng)桿菌是普遍存在于土壤中的一種革蘭氏陰性細(xì)菌,它能在自然條件下趨化性地感染大多數(shù)雙子葉植物的受傷部位,并誘導(dǎo)產(chǎn)生冠癭瘤或發(fā)狀根。
根癌農(nóng)桿菌和發(fā)根農(nóng)桿菌中細(xì)胞中分別含有Ti質(zhì)粒和Ri質(zhì)粒,其上有一段T-DNA,農(nóng)桿菌通過侵染植物傷口進(jìn)入細(xì)胞后,可將T-DNA插入到植物基因組中。
因此,農(nóng)桿菌是一種天然的植物遺傳轉(zhuǎn)化體系。
人們將目的基因插入到經(jīng)過改造的T-DNA區(qū),借助農(nóng)桿菌的感染實(shí)現(xiàn)外源基因向植物細(xì)胞的轉(zhuǎn)移與整合,然后通過細(xì)胞和組織培養(yǎng)技術(shù),再生出轉(zhuǎn)基因植株。
農(nóng)桿菌介導(dǎo)法起初只被用于雙子葉植物中,近年來,農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化在一些單子葉植物(尤其是水稻)中也得到了廣泛應(yīng)用。
2.基因槍介導(dǎo)轉(zhuǎn)化法利用火藥爆炸或高壓氣體加速(這一加速設(shè)備被稱為基因槍),將包裹了帶目的基因的DNA溶液的高速微彈直接送入完整的植物組織和細(xì)胞中,然后通過細(xì)胞和組織培養(yǎng)技術(shù),再生出植株,選出其中轉(zhuǎn)基因陽性植株即為轉(zhuǎn)基因植株。
與農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化相比,基因槍法轉(zhuǎn)化的一個(gè)主要優(yōu)點(diǎn)是不受受體植物范圍的限制。
而且其載體質(zhì)粒的構(gòu)建也相對簡單,因此也是目前轉(zhuǎn)基因研究中應(yīng)用較為廣泛的一種方法。
3.花粉管通道法在授粉后向子房注射合目的基因的DNA溶液,利用植物在開花、受精過程中形成的花粉管通道,將外源DNA導(dǎo)入受精卵細(xì)胞,并進(jìn)一步地被整合到受體細(xì)胞的基因組中,隨著受精卵的發(fā)育而成為帶轉(zhuǎn)基因的新個(gè)體。
該方法于80年代初期由我國學(xué)者周光宇提出,我國目前推廣面積最大的轉(zhuǎn)基因抗蟲棉就是用花粉管通道法培育出來的。
該法的最大優(yōu)點(diǎn)是不依賴組織培養(yǎng)人工再生植株,技術(shù)簡單,不需要裝備精良的實(shí)驗(yàn)室,常規(guī)育種工作者易于掌握。
常用的動(dòng)物轉(zhuǎn)基因技術(shù)1.顯微注射法在顯微鏡下,用一根極細(xì)的玻璃針(直徑1-2微米)直接將DNA注射到胚胎的細(xì)胞核內(nèi),再把注射過DNA的胚胎移植到動(dòng)物體內(nèi),使之發(fā)育成正常的幼仔。
用這種方法生產(chǎn)的動(dòng)物約有十分之一是整合外源基因的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。
2.體細(xì)胞核移植方法先在體外培養(yǎng)的體細(xì)胞中進(jìn)行基因?qū)耄Y選獲得帶轉(zhuǎn)基因的細(xì)胞。
然后,將帶轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞移植到去掉細(xì)胞核的卵細(xì)胞中,生產(chǎn)重構(gòu)胚胎。
重構(gòu)胚胎經(jīng)移植到母體中,產(chǎn)生的仔畜百分之百是轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。
轉(zhuǎn)基因技術(shù)與傳統(tǒng)技術(shù)的關(guān)系自從人類耕種作物以來,我們的祖先就從未停止過作物的遺傳改良。
過去的幾千年里農(nóng)作物改良的方式主要是對自然突變產(chǎn)生的優(yōu)良基因和重組體的選擇和利用,通過隨機(jī)和自然的方式來積累優(yōu)良基因。
遺傳學(xué)創(chuàng)立后近百年的動(dòng)植物育種則是采用人工雜交的方法,進(jìn)行優(yōu)良基因的重組和外源基因的導(dǎo)入而實(shí)現(xiàn)遺傳改良。
因此,轉(zhuǎn)基因技術(shù)與傳統(tǒng)技術(shù)是一脈相承的,其本質(zhì)都是通過獲得優(yōu)良基因進(jìn)行遺傳改良。
但在基因轉(zhuǎn)移的范圍和效率上,轉(zhuǎn)基因技術(shù)與傳統(tǒng)育種技術(shù)有兩點(diǎn)重要區(qū)別。
第一,傳統(tǒng)技術(shù)一般只能在生物種內(nèi)個(gè)體間實(shí)現(xiàn)基因轉(zhuǎn)移,而轉(zhuǎn)基因技術(shù)所轉(zhuǎn)移的基因則不受生物體間親緣關(guān)系的限制。
第二,傳統(tǒng)的雜交和選擇技術(shù)一般是在生物個(gè)體水平上進(jìn)行,操作對象是整個(gè)基因組,所轉(zhuǎn)移的是大量的基因,不可能準(zhǔn)確地對某個(gè)基因進(jìn)行操作和選擇,對后代的表現(xiàn)預(yù)見性較差。
而轉(zhuǎn)基因技術(shù)所操作和轉(zhuǎn)移的一般是經(jīng)過明確定義的基因,功能清楚,后代表現(xiàn)可準(zhǔn)確預(yù)期。
因此,轉(zhuǎn)基因技術(shù)是對傳統(tǒng)技術(shù)的發(fā)展和補(bǔ)充。
將兩者緊密結(jié)合,可相得益彰,大大地提高動(dòng)植物品種改良的效率。
下面分別對轉(zhuǎn)基因動(dòng)物和轉(zhuǎn)基因植物來進(jìn)行描述。
一、轉(zhuǎn)基因植物轉(zhuǎn)基因植物是基因組中含有外源基因的植物。
它可通過原生質(zhì)體融合、細(xì)胞重組、遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移、染色體工程技術(shù)獲得,有可能改變植物的某些遺傳特性,培育高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、抗病毒、抗蟲、抗寒、抗旱、抗?jié)场⒖果}堿、抗除草劑等的作物新品種。
而且可用轉(zhuǎn)基因植物或離體培養(yǎng)的細(xì)胞,來生產(chǎn)外源基因的表達(dá)產(chǎn)物,如人的生長素、胰島素、干擾素、白介素2、表皮生長因子、乙型肝炎疫苗等基因已在轉(zhuǎn)基因植物中得到表達(dá)。
二、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物轉(zhuǎn)基因動(dòng)物就是基因組中含有外源基因的動(dòng)物。
它是按照預(yù)先的設(shè)計(jì),通過細(xì)胞融合、細(xì)胞重組、遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移、染色體工程和基因工程技術(shù)將外源基因?qū)刖?、卵?xì)胞或受精卵,再以生殖工程技術(shù),有可能育成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。
通過生長素基因、多產(chǎn)基因、促卵素基因、高泌乳量基因、瘦肉型基因、角蛋白基因、抗寄生蟲基因、抗病毒基因等基因轉(zhuǎn)移,可能育成生長周期短,產(chǎn)仔、生蛋多和泌乳量高,生產(chǎn)的肉類、皮毛品質(zhì)與加工性能好,并具有抗病性,已在牛、羊、豬、雞、魚等家養(yǎng)動(dòng)物中取得一定成果。
還可將轉(zhuǎn)基因動(dòng)物作為生物工廠(Biofactories),如以轉(zhuǎn)基因小鼠生產(chǎn)凝血因子IX、組織型血纖維溶酶原激活因子(t-PA)、白細(xì)胞介素2、α1-抗胰蛋白酶,以轉(zhuǎn)基因綿羊生產(chǎn)人的α1-抗胰蛋白酶,以轉(zhuǎn)基因山羊、奶牛生產(chǎn)LAt-PA,以轉(zhuǎn)基因豬生產(chǎn)人血紅蛋白等,這些基因產(chǎn)品具有高效、優(yōu)質(zhì)、廉價(jià)與相應(yīng)的人體蛋白具有同樣的生物活性,且多隨乳汁分泌,便于分離純化。
但由于轉(zhuǎn)基因動(dòng)物受遺傳鑲嵌性和雜合性的影響,其有性生殖后代變異較大,難以形成穩(wěn)定遺傳的轉(zhuǎn)基因品系。
因而,嘗試從受體動(dòng)物細(xì)胞中分離出線粒體,以外源基因?qū)ζ溥M(jìn)行離體轉(zhuǎn)化,再將轉(zhuǎn)基因線粒體導(dǎo)入受精卵,所發(fā)育成的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物雌性個(gè)體外培養(yǎng)的卵細(xì)胞與任一雄性個(gè)體交配或體外人工授精,由于線粒體的細(xì)胞質(zhì)遺傳,其有性后代可能全都是轉(zhuǎn)基因個(gè)體。
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標(biāo)簽: 什么是轉(zhuǎn)基因
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