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轉基因技術的定義將人工分離和修飾過的基因?qū)氲缴矬w基因組中,由于導入基因的表達,引起生物體的性狀的可遺傳的修飾,這一技術稱之為轉基因技術。
人們常說的"遺傳工程"、"基因工程"、"遺傳轉化"均為轉基因的同義詞。
經(jīng)轉基因技術修飾的生物體在媒體上常被稱為"遺傳修飾過的生物體"(Genetically modified organism,簡稱GMO)。
幾種常用的植物轉基因方法遺傳轉化的方法按其是否需要通過組織培養(yǎng)、再生植株可分成兩大類,第一類需要通過組織培養(yǎng)再生植株,常用的方法有農(nóng)桿菌介導轉化法、基因槍法;另一類方法不需要通過組織培養(yǎng),目前比較成熟的主要有花粉管通道法。
1.農(nóng)桿菌介導轉化法農(nóng)桿菌是普遍存在于土壤中的一種革蘭氏陰性細菌,它能在自然條件下趨化性地感染大多數(shù)雙子葉植物的受傷部位,并誘導產(chǎn)生冠癭瘤或發(fā)狀根。
根癌農(nóng)桿菌和發(fā)根農(nóng)桿菌中細胞中分別含有Ti質(zhì)粒和Ri質(zhì)粒,其上有一段T-DNA,農(nóng)桿菌通過侵染植物傷口進入細胞后,可將T-DNA插入到植物基因組中。
因此,農(nóng)桿菌是一種天然的植物遺傳轉化體系。
人們將目的基因插入到經(jīng)過改造的T-DNA區(qū),借助農(nóng)桿菌的感染實現(xiàn)外源基因向植物細胞的轉移與整合,然后通過細胞和組織培養(yǎng)技術,再生出轉基因植株。
農(nóng)桿菌介導法起初只被用于雙子葉植物中,近年來,農(nóng)桿菌介導轉化在一些單子葉植物(尤其是水稻)中也得到了廣泛應用。
2.基因槍介導轉化法利用火藥爆炸或高壓氣體加速(這一加速設備被稱為基因槍),將包裹了帶目的基因的DNA溶液的高速微彈直接送入完整的植物組織和細胞中,然后通過細胞和組織培養(yǎng)技術,再生出植株,選出其中轉基因陽性植株即為轉基因植株。
與農(nóng)桿菌轉化相比,基因槍法轉化的一個主要優(yōu)點是不受受體植物范圍的限制。
而且其載體質(zhì)粒的構建也相對簡單,因此也是目前轉基因研究中應用較為廣泛的一種方法。
3.花粉管通道法在授粉后向子房注射合目的基因的DNA溶液,利用植物在開花、受精過程中形成的花粉管通道,將外源DNA導入受精卵細胞,并進一步地被整合到受體細胞的基因組中,隨著受精卵的發(fā)育而成為帶轉基因的新個體。
該方法于80年代初期由我國學者周光宇提出,我國目前推廣面積最大的轉基因抗蟲棉就是用花粉管通道法培育出來的。
該法的最大優(yōu)點是不依賴組織培養(yǎng)人工再生植株,技術簡單,不需要裝備精良的實驗室,常規(guī)育種工作者易于掌握。
常用的動物轉基因技術1.顯微注射法在顯微鏡下,用一根極細的玻璃針(直徑1-2微米)直接將DNA注射到胚胎的細胞核內(nèi),再把注射過DNA的胚胎移植到動物體內(nèi),使之發(fā)育成正常的幼仔。
用這種方法生產(chǎn)的動物約有十分之一是整合外源基因的轉基因動物。
2.體細胞核移植方法先在體外培養(yǎng)的體細胞中進行基因?qū)?,篩選獲得帶轉基因的細胞。
然后,將帶轉基因體細胞移植到去掉細胞核的卵細胞中,生產(chǎn)重構胚胎。
重構胚胎經(jīng)移植到母體中,產(chǎn)生的仔畜百分之百是轉基因動物。
轉基因技術與傳統(tǒng)技術的關系自從人類耕種作物以來,我們的祖先就從未停止過作物的遺傳改良。
過去的幾千年里農(nóng)作物改良的方式主要是對自然突變產(chǎn)生的優(yōu)良基因和重組體的選擇和利用,通過隨機和自然的方式來積累優(yōu)良基因。
遺傳學創(chuàng)立后近百年的動植物育種則是采用人工雜交的方法,進行優(yōu)良基因的重組和外源基因的導入而實現(xiàn)遺傳改良。
因此,轉基因技術與傳統(tǒng)技術是一脈相承的,其本質(zhì)都是通過獲得優(yōu)良基因進行遺傳改良。
但在基因轉移的范圍和效率上,轉基因技術與傳統(tǒng)育種技術有兩點重要區(qū)別。
第一,傳統(tǒng)技術一般只能在生物種內(nèi)個體間實現(xiàn)基因轉移,而轉基因技術所轉移的基因則不受生物體間親緣關系的限制。
第二,傳統(tǒng)的雜交和選擇技術一般是在生物個體水平上進行,操作對象是整個基因組,所轉移的是大量的基因,不可能準確地對某個基因進行操作和選擇,對后代的表現(xiàn)預見性較差。
而轉基因技術所操作和轉移的一般是經(jīng)過明確定義的基因,功能清楚,后代表現(xiàn)可準確預期。
因此,轉基因技術是對傳統(tǒng)技術的發(fā)展和補充。
將兩者緊密結合,可相得益彰,大大地提高動植物品種改良的效率。
下面分別對轉基因動物和轉基因植物來進行描述。
一、轉基因植物轉基因植物是基因組中含有外源基因的植物。
它可通過原生質(zhì)體融合、細胞重組、遺傳物質(zhì)轉移、染色體工程技術獲得,有可能改變植物的某些遺傳特性,培育高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、抗病毒、抗蟲、抗寒、抗旱、抗?jié)?、抗鹽堿、抗除草劑等的作物新品種。
而且可用轉基因植物或離體培養(yǎng)的細胞,來生產(chǎn)外源基因的表達產(chǎn)物,如人的生長素、胰島素、干擾素、白介素2、表皮生長因子、乙型肝炎疫苗等基因已在轉基因植物中得到表達。
二、轉基因動物轉基因動物就是基因組中含有外源基因的動物。
它是按照預先的設計,通過細胞融合、細胞重組、遺傳物質(zhì)轉移、染色體工程和基因工程技術將外源基因?qū)刖?、卵細胞或受精卵,再以生殖工程技術,有可能育成轉基因動物。
通過生長素基因、多產(chǎn)基因、促卵素基因、高泌乳量基因、瘦肉型基因、角蛋白基因、抗寄生蟲基因、抗病毒基因等基因轉移,可能育成生長周期短,產(chǎn)仔、生蛋多和泌乳量高,生產(chǎn)的肉類、皮毛品質(zhì)與加工性能好,并具有抗病性,已在牛、羊、豬、雞、魚等家養(yǎng)動物中取得一定成果。
還可將轉基因動物作為生物工廠(Biofactories),如以轉基因小鼠生產(chǎn)凝血因子IX、組織型血纖維溶酶原激活因子(t-PA)、白細胞介素2、α1-抗胰蛋白酶,以轉基因綿羊生產(chǎn)人的α1-抗胰蛋白酶,以轉基因山羊、奶牛生產(chǎn)LAt-PA,以轉基因豬生產(chǎn)人血紅蛋白等,這些基因產(chǎn)品具有高效、優(yōu)質(zhì)、廉價與相應的人體蛋白具有同樣的生物活性,且多隨乳汁分泌,便于分離純化。
但由于轉基因動物受遺傳鑲嵌性和雜合性的影響,其有性生殖后代變異較大,難以形成穩(wěn)定遺傳的轉基因品系。
因而,嘗試從受體動物細胞中分離出線粒體,以外源基因?qū)ζ溥M行離體轉化,再將轉基因線粒體導入受精卵,所發(fā)育成的轉基因動物雌性個體外培養(yǎng)的卵細胞與任一雄性個體交配或體外人工授精,由于線粒體的細胞質(zhì)遺傳,其有性后代可能全都是轉基因個體。
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標簽: 什么是轉基因
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