計數(shù)板計數(shù)原則（計數(shù)板）

關(guān)于計數(shù)板計數(shù)原則，計數(shù)板這個問題很多朋友還不知道，今天小六來為大家解答以上的問題，現(xiàn)在讓我們一起來看看吧！

1、血球計數(shù)板 　　1 血球計數(shù)板 ．視待測菌懸液濃度，加無菌水適當稀釋（斜面一般稀釋100倍），以每小格的菌數(shù)可數(shù)為度。

2、 2．取潔凈的血球計數(shù)板一塊，在計數(shù)區(qū)上蓋上一塊蓋玻片。

3、 　　3．將菌懸液搖勻，用滴管吸取少許，從計數(shù)板中間平臺兩側(cè)的溝槽內(nèi)沿蓋玻片的下邊緣摘入一小滴（不宜過多），讓菌懸液利用液體的表面張力充滿計數(shù)區(qū)，勿使氣泡產(chǎn)生，并用吸水紙吸去溝槽中流出的多余菌懸液。

4、也可以將菌懸液直接滴加在計數(shù)區(qū)上（不要使計數(shù)區(qū)兩邊平臺沾上菌懸液，以免加蓋蓋玻片后，造成計數(shù)區(qū)深度的升高），然后加蓋蓋玻片（勿使產(chǎn)生氣泡）。

5、 　　4．靜置片刻，使細胞沉降到計數(shù)板上，不再隨液體漂移。

6、將血球計數(shù)板放置于顯微鏡的載物臺上夾穩(wěn)，先在低倍鏡下找到計數(shù)區(qū)后，再轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察并計數(shù)。

7、由于生活細胞的折光率和水的折光率相近，觀察時應減弱光照的強度。

8、 　　5．計數(shù)時若計數(shù)區(qū)是由16個大方格組成，按對角線方位，數(shù)左上、左下、右上、右下的4個大方格（即100小格）的菌數(shù)。

9、如果是25個大方格組成的計數(shù)區(qū)，除數(shù)上述四個大方格外，還需數(shù)中央1個大方格的 　　血球計數(shù)板 　　 血球計數(shù)板 菌數(shù)（即80個小格）。

10、為了保證計數(shù)的準確性，避免重復計數(shù)和漏記，在計數(shù)時，對沉降在格線上的細胞的統(tǒng)計應有統(tǒng)一的規(guī)定。

11、如菌體位于大方格的雙線上，計數(shù)時則數(shù)上線不數(shù)下線，數(shù)左線不數(shù)右線，以減少誤差。

12、即位于本格上線和左線上的細胞計入本格，本格的下線和右線上的細胞按規(guī)定計入相應的格中。

13、見右圖：即本格中計數(shù)細胞為3個。

14、6．對于出芽的酵母菌，芽體達到母細胞大小一半時，即可作為兩個菌體計算。

15、每個樣品重復計數(shù)2-3次（每次數(shù)值不應相差過大，否則應重新操作），按公式計算出每mL（g）菌懸液所含細胞數(shù)量。

16、 　　7．測數(shù)完畢，取下蓋玻片，用水將血球計數(shù)板沖洗干凈，切勿用硬物洗刷或抹擦，以免損壞網(wǎng)格刻度。

17、洗凈后自行晾干或用吹風機吹干，放入盒內(nèi)保存。

18、 以計數(shù)酵母菌為例 　　(1)用血球計數(shù)板計數(shù)酵母菌懸液的酵母菌個數(shù). 　　(2)樣品稀釋的目的是便于酵母菌懸液的計數(shù),以每小方格內(nèi)含有4-5個酵母細胞為宜,一般稀釋10倍即可. 　　(3)將血球計數(shù)板用擦鏡紙擦凈,在中央的計數(shù)室上加蓋專用的厚玻片. 　　(4)將稀釋后的酵母菌懸液,用吸管吸取一滴置于蓋玻片的邊緣,使菌液緩緩滲入,多余的菌液用吸水紙吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球計數(shù)室內(nèi). 　　(5)計數(shù)時,如果使用16格×25格規(guī)格的計數(shù)室,要按對角線位,取左上,右上,左下,右下4個中格(即100個小格)的酵母菌數(shù).如果規(guī)格為25格×16格的計數(shù)板,除了取其4個對角方位外,還需再數(shù)中央的一個中格(即80個小方格)的酵母菌數(shù). 　　(6)當遇到位于大格線上的酵母菌,一般只計數(shù)大方格的上方和右方線上的酵母細胞(或只計數(shù)下方和左方線上的酵母細胞). 　　(7)對每個樣品計數(shù)三次,取其平均值,按下列公式計算每1ml菌液中所含的酵母菌個數(shù). 　　3.計算公式 　　(1)16格×25格的血球計數(shù)板計算公式: 　　酵母細胞數(shù)/ml=100小格內(nèi)酵母細胞個數(shù)/100×400×10四次方×稀釋倍數(shù) 　　(2)25格x16格的血球計數(shù)板計算公式: 　　酵母細胞數(shù)/ml=80小格內(nèi)酵母細胞個數(shù)/80×400×10四次方×稀釋倍數(shù) 　　4.血球計數(shù)板的清潔 　　血球汁數(shù)板使用后,用自來水沖洗,切勿用硬物洗刷,洗后自行晾干或用吹風機吹干,或用95%的乙醇,無水乙醇,丙酮等有機溶劑脫水使其干燥.通過鏡檢觀察每小格內(nèi)是否殘留菌體或其他沉淀物.若不干凈,則必須重復清洗直到干凈為止.。

本文分享完畢，希望對大家有所幫助。

標簽：