關(guān)于gapdh是什么蛋白,gapdh分子量是什么這個(gè)問題很多朋友還不知道,今天小六來為大家解答以上的問題,現(xiàn)在讓我們一起來看看吧!
1、gapdh分子量是:146 kDa。
2、GAPDH(甘油醛-3-磷酸脫氫酶)是參與糖酵解的一種關(guān)鍵酶,由4個(gè)30-40kDa的亞基組成,分子量146kDa,檢測條帶大約在36kDa。
3、GAPDH基因幾乎在所有組織中都高水平表達(dá),廣泛用作Western blot蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)化的內(nèi)參。
4、因?yàn)镚APDH作為看家基因在同種細(xì)胞或者組織中的蛋白質(zhì)表達(dá)量一般是恒定的,因此在使用GAPDH內(nèi)參抗體時(shí),將每個(gè)樣品測得的目的蛋白含量與本樣品的GAPDH含量相除,得到每個(gè)樣品目的蛋白的相對(duì)含量,然后才進(jìn)行樣品與樣品之間的比較。
5、選擇合適的GAPDH抗體:內(nèi)參抗體雖然選擇較多,但是也需要遵循一定的原則,并契合實(shí)際的應(yīng)用要求。
6、首先,我們需要考慮目的蛋白的大小,我們推薦內(nèi)參要與檢測的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上,因此你需要根據(jù)你目的檢測蛋白的分子量來選擇合適的內(nèi)參。
7、由于GAPDH的檢測分子量大約在36kD,因此該內(nèi)參抗體不是很適合用于檢測30kD-40kD大小目標(biāo)蛋白的WB實(shí)驗(yàn)中。
8、另外,不同的組織來源的樣本在選擇內(nèi)參時(shí)還有一定的區(qū)別。
9、比如某些細(xì)胞中,由于組織缺氧、糖尿病等因素會(huì)導(dǎo)致GAPDH的表達(dá)增高,不適合做內(nèi)參。
10、以上內(nèi)容參考:百度百科-GAPDH。
本文分享完畢,希望對(duì)大家有所幫助。
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