關(guān)于southern blot試劑盒,southern blot這個(gè)問題很多朋友還不知道,今天小六來為大家解答以上的問題,現(xiàn)在讓我們一起來看看吧!
1、原理:Southern印跡雜交是進(jìn)行基因組DNA特定序列定位的通用方法。
2、其基本原理是:具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定的條件下,可按堿基互補(bǔ)的原則特異性地雜交形成雙鏈。
3、一般利用瓊脂糖凝膠電泳分離經(jīng)限制性內(nèi)切酶消化的DNA片段,將膠上的DNA變性并在原位將單鏈DNA片段轉(zhuǎn)移至尼龍膜或其他固相支持物上,經(jīng)干烤或者紫外線照射固定,再與相對應(yīng)結(jié)構(gòu)的標(biāo)記探針進(jìn)行雜交,用放射自顯影或酶反應(yīng)顯色,從而檢測特定DNA分子的含量。
4、2、應(yīng)用:(1)遺傳病診斷;(2)DNA圖譜分析;(3)檢測樣品中的DNA及其含量:先將DNA樣品(含不同大小的DNA片段)先按片段長短進(jìn)行分離,然后進(jìn)行雜交。
5、這樣可確定雜交靶分子的大小。
6、(4)PCR產(chǎn)物分析。
7、擴(kuò)展資料Southern印跡雜交技術(shù)的過程:Southern印跡雜交技術(shù)包括兩個(gè)主要過程:一是將待測定核酸分子通過一定的方法轉(zhuǎn)移并結(jié)合到一定的固相支持物(硝酸纖維素膜或尼龍膜)上,即印跡(blotting);二是固定于膜上的核酸與同位素標(biāo)記的探針在一定的溫度和離子強(qiáng)度下退火,即分子雜交過程。
8、該技術(shù)是1975年英國愛丁堡大學(xué)的e.***.southern首創(chuàng)的,Southern印跡雜交故因此而得名。
9、早期的Southern印跡是將凝膠中的DNA變性后,經(jīng)毛細(xì)管的虹吸作用,轉(zhuǎn)移到硝酸纖維膜上。
10、印跡方法如電轉(zhuǎn)法、真空轉(zhuǎn)移法;濾膜發(fā)展了尼龍膜、化學(xué)活化膜(如APT、ABM纖維素膜)等。
11、利用Southern印跡法可進(jìn)行克隆基因的酶切、圖譜分析、基因組中某一基因的定性及定量分析、基因突變分析及限制性片斷長度多態(tài)性分析(RFLP)等。
12、參考資料來源:百度百科-Southern印跡雜交技術(shù)。
本文分享完畢,希望對大家有所幫助。
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