關于重組質(zhì)粒是什么,質(zhì)粒是什么這個問題很多朋友還不知道,今天小六來為大家解答以上的問題,現(xiàn)在讓我們一起來看看吧!
1、質(zhì)粒(Plasmid) 質(zhì)粒是真核細胞細胞核外或原核生物擬核區(qū)外能夠進行自主復制的遺傳單位,包括真核生物的細胞器(主要指線粒體和葉綠體)中和細菌細胞擬核區(qū)以外的環(huán)狀脫氧核糖核酸(DNA)分子。
2、現(xiàn)在習慣上用來專指細菌(大腸桿菌)、酵母菌和放線菌等生物中細胞核或擬核中的DNA以外的DNA分子。
3、在基因工程中質(zhì)粒常被用做基因的載體(Vector)。
4、許多細菌除了擬核中的DNA外,還有大量很小的環(huán)狀DNA分子,這就是質(zhì)粒(plasmid)(補充:部分質(zhì)粒為RNA)。
5、質(zhì)粒上常有抗生素的抗性基因,例如,四環(huán)素抗性基因或卡那霉素抗性基因等。
6、有些質(zhì)粒稱為附加體(episome),這類質(zhì)粒能夠整合進細菌的染色體,也能從整合位置上切離下來成為游離于染色體外的DNA分子。
7、 目前,已發(fā)現(xiàn)有質(zhì)粒的細菌有幾百種,已知的絕大多數(shù)的細菌質(zhì)粒都是閉合環(huán)狀DNA分子(簡稱cccDNA)。
8、細菌質(zhì)粒的相對分子質(zhì)量一般較小,約為細菌染色體的0.5%~3%。
9、根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小,大致上可以把質(zhì)粒分成大小兩類:較大一類的相對分子質(zhì)量是40×106以上,較小一類的相對分子質(zhì)量是10×106以下(少數(shù)質(zhì)粒的相對分子質(zhì)量介于兩者之間)。
10、每個細胞中的質(zhì)粒數(shù)主要決定于質(zhì)粒本身的復制特性。
11、按照復制性質(zhì),可以把質(zhì)粒分為兩類:一類是嚴緊型質(zhì)粒,當細胞染色體復制一次時,質(zhì)粒也復制一次,每個細胞內(nèi)只有1~2個質(zhì)粒;另一類是松弛型質(zhì)粒,當染色體復制停止后仍然能繼續(xù)復制,每一個細胞內(nèi)一般有20個左右質(zhì)粒。
12、這些質(zhì)粒的復制是在寄主細胞的松弛控制之下的,每個細胞中含有10-200份拷貝,如果用一定的藥物處理抑制寄主蛋白質(zhì)的合成還會使質(zhì)粒拷貝數(shù)增至幾千份。
13、如較早的質(zhì)粒pBR322即屬于松弛型質(zhì)粒,要經(jīng)過氯霉素處理才能達到更高拷貝數(shù)。
14、一般分子量較大的質(zhì)粒屬嚴緊型。
15、分子量較小的質(zhì)粒屬松弛型。
16、質(zhì)粒的復制有時和它們的宿主細胞有關,某些質(zhì)粒在大腸桿菌內(nèi)的復制屬嚴緊型,而在變形桿菌內(nèi)則屬松弛型。
17、 在基因工程中,常用人工構建的質(zhì)粒作為載體。
18、人工構建的質(zhì)??梢约喾N有用的特征于一體,如含多種單一酶切位點、抗生素耐藥性等。
19、常用的人工質(zhì)粒運載體有pBR322、pSC101。
20、pBR322含有抗四環(huán)素基因(Tcr)和抗氨芐青霉素基因(Apr),并含有5種內(nèi)切酶的單一切點。
21、如果將DNA片段插入EcoRI切點,不會影響兩個抗生素基因的表達。
22、但是如果將DNA片段插入到Hind III、Bam H I 或 Sal I切點,就會使抗四環(huán)素基因失活。
23、這時,含有DNA插入片段的pBR322將使宿主細菌抗氨芐青霉素,但對四環(huán)素敏感。
24、沒有DNA插入片段的pBR322會使宿主細菌既抗氨芐青霉素又抗四環(huán)素,而沒有pBR322質(zhì)粒的細菌將對氨芐青霉素和四環(huán)素都敏感。
25、pSC101與pBR322相似,只是沒有抗氨芐青霉素基因和PstI切點。
26、質(zhì)粒運載體的最大插入片段約為10 kb(kb表示為千堿基對)。
本文分享完畢,希望對大家有所幫助。
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