導(dǎo)讀 關(guān)于回文序列和發(fā)卡結(jié)構(gòu)這個問題很多朋友還不知道,今天小六來為大家解答以上的問題,現(xiàn)在讓我們一起來看看吧!1、(1)看引物序列里有無回
關(guān)于回文序列和發(fā)卡結(jié)構(gòu)這個問題很多朋友還不知道,今天小六來為大家解答以上的問題,現(xiàn)在讓我們一起來看看吧!
1、(1)看引物序列里有無回文序列。
2、(2)不是的,引物二聚體的產(chǎn)生原因比較多,其中很重要的一個就是引物自身的原因,也就是設(shè)計的引物特異性不好,不能有效的和模板進(jìn)行結(jié)合,而出現(xiàn)引物自身配對結(jié)合的情況導(dǎo)致二聚提的出現(xiàn);其次還可能是PCR體系及反應(yīng)條件的問題,如果PCR體系中引物、鎂離子以及酶濃度過高等,都容易產(chǎn)生二聚體,這時要適當(dāng)降低濃度,比如20uLPCR體系中,一般10pmol/ul的引物,加0.2ul就可以了;還有可能是退火溫度的問題,可以做個梯度PCR或降落PCR,來摸索一個合適的退火溫度,也可有效地減少二聚提的出現(xiàn)。
3、引物設(shè)計可以使用Primer Premier 5.0,操作比較簡便,同時它可以自動分析引物是否有發(fā)夾結(jié)構(gòu)、引物二聚體等,非常方便。
本文分享完畢,希望對大家有所幫助。
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