cck8實驗過程（cck 8實驗方法）

關(guān)于cck8實驗過程，cck 8實驗方法這個問題很多朋友還不知道，今天小六來為大家解答以上的問題，現(xiàn)在讓我們一起來看看吧！

1、方法/步驟分步閱讀1/5先用細胞計數(shù)板計數(shù)所制備的細胞懸液中的細胞數(shù)量，然后接種細胞到培養(yǎng)板內(nèi)。

2、2/5按比例（例如：1/2比例）依次用培養(yǎng)基等比稀釋成一個細胞濃度梯度，一般要做3-5個細胞濃度梯度，每個濃度建議3-6個復(fù)孔。

3、3/5接種后培養(yǎng)2-4小時使細胞貼壁，然后加CCK試劑培養(yǎng)一定時間后測定OD值，制作出一條以細胞數(shù)量為橫坐標(biāo)（X軸），OD值為縱坐標(biāo)（Y軸）的標(biāo)準曲線。

4、根據(jù)此標(biāo)準曲線可以測定出未知樣品的細胞數(shù)量（使用此標(biāo)準曲線的前提是實驗的條件要一致，便于確定細胞的接種數(shù)量以及加入CCK后的培養(yǎng)時間。

5、）4/5在96孔板中接種細胞懸液（100μL/孔）。

6、將培養(yǎng)板放在培養(yǎng)箱中預(yù)培養(yǎng)一段時間（37℃,5% CO2），向每孔加入10 μL CCK溶液（注意不要在孔中生成氣泡，它們會影響OD值的讀數(shù)），將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育1-4小時。

7、5/5用酶標(biāo)儀測定在450nm處的吸光度。

8、若暫時不測定OD值，可以向每孔中加入10 μL 0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液，并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。

9、24小時內(nèi)測定，吸光度不會發(fā)生變化。

10、總結(jié)：1/1先用細胞計數(shù)板計數(shù)所制備的細胞懸液中的細胞數(shù)量,然后接種細胞。

11、2、按比例 ( 例如:1/2比例 ) 依次用培養(yǎng)基等比稀釋成一個細胞濃度梯度。

12、3、建議先做幾個孔摸索接種細胞的數(shù)量和加入CCK試劑后的培養(yǎng)時間。

13、注意事項如果待測物質(zhì)有氧化性或還原性的話，可在加CCK之前更換新鮮培養(yǎng)基。

14、當(dāng)然藥物影響比較小的情況下，可以不更換培養(yǎng)基，直接扣除培養(yǎng)基中加入藥物后的空白吸收即可。

本文分享完畢，希望對大家有所幫助。

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