關(guān)于sirna是什么,siRNA是什么這個(gè)問(wèn)題很多朋友還不知道,今天小六來(lái)為大家解答以上的問(wèn)題,現(xiàn)在讓我們一起來(lái)看看吧!
1、Ⅲ家族中對(duì)雙鏈RNA具有特異性的酶)加工而成。
2、SiRNA是siRISC的主要成員,激發(fā)與之互補(bǔ)的目標(biāo)mRNA的沉默。
3、siRNA原理: RNA干涉(RNAi)在實(shí)驗(yàn)室中是一種強(qiáng)大的實(shí)驗(yàn)工具,利用具有同源性的雙鏈RNA(dsRNA)誘導(dǎo)序列特異的目標(biāo)基因的沉寂,迅速阻斷基因活性。
4、siRNA在RNA沉寂通道中起中心作用,是對(duì)特定信使RNA(mRNA)進(jìn)行降解的指導(dǎo)要素。
5、siRNA是RNAi途徑中的中間產(chǎn)物,是RNAi發(fā)揮效應(yīng)所必需的因子。
6、siRNA的形成主要由Dicer和Rde-1調(diào)控完成。
7、由于RNA 病毒入侵、轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)錄、基因組中反向重復(fù)序列轉(zhuǎn)錄等原因,細(xì)胞中出現(xiàn)了dsRNA,Rde-1(RNAi缺陷基因-1)編碼的蛋白質(zhì)識(shí)別外源dsRNA,當(dāng)dsRNA達(dá)到一定量的時(shí)候,Rde-1引導(dǎo)dsRNA與Rde-1編碼的Dicer(Dicer是一種RNaseIII 活性核酸內(nèi)切酶,具有四個(gè)結(jié)構(gòu)域:Argonaute家族的PAZ結(jié)構(gòu)域,III型RNA酶活性區(qū)域,dsRNA結(jié)合區(qū)域以及DEAH/DEXHRNA解旋酶活性區(qū))結(jié)合,形成酶-dsRNA復(fù)合體。
8、在Dicer酶的作用下,細(xì)胞中的單鏈靶mRNA(與dsRNA具有同源序列)與dsRNA的正義鏈互換,原來(lái)dsRNA中的正義鏈被mRNA代替而從酶-dsRNA復(fù)合物中釋放出來(lái),然后,在ATP的參與下,細(xì)胞中存在的一種RNA誘導(dǎo)的沉默復(fù)合體RNA-induced silencing complex (RISC,由核酸內(nèi)切酶、核酸外切酶、解旋酶等構(gòu)成,作用是對(duì)靶mRNA進(jìn)行識(shí)別和切割)利用結(jié)合在其上的核酸內(nèi)切酶的活性來(lái)切割dsRNA上處于原來(lái)正義鏈位置的靶mRNA分子中與dsRNA反義鏈互補(bǔ)的區(qū)域,形成21-23nt的dsRNA小片段,這些小片段即為siRNA。
9、RNAi干涉的關(guān)鍵步驟是組裝RISC和合成介導(dǎo)特異性反應(yīng)的siRNA蛋白。
10、siRNA并入RISC中,然后與靶標(biāo)基因編碼區(qū)或UTR區(qū)完全配對(duì),降解靶標(biāo)基因,因此說(shuō)siRNA只降解與其序列互補(bǔ)配對(duì)的mRNA。
11、其調(diào)控的機(jī)制是通過(guò)互補(bǔ)配對(duì)而沉默相應(yīng)靶位基因的表達(dá),所以是一種典型的負(fù)調(diào)控機(jī)制。
12、siRNA識(shí)別靶序列是有高度特異性的,因?yàn)榻到馐紫仍谙鄬?duì)于siRNA來(lái)說(shuō)的中央位置發(fā)生,所以這些中央的堿基位點(diǎn)就顯得極為重要,一旦發(fā)生錯(cuò)配就會(huì)嚴(yán)重抑制RNAi的效應(yīng)。
13、 siRNA有如下特點(diǎn): 1. 長(zhǎng)度約在22nt左右。
14、2. 依賴Dicer酶的加工,是Dicer的產(chǎn)物,所以具有Dicer產(chǎn)物的特點(diǎn)。
15、 3. 生成需要Argonaute家族蛋白存在。
16、 4. 是RISC組分。
17、 5. siRNA合成是由雙鏈的RNA或RNA前體形成的。
18、6. siRNA是人工體外合成的,通過(guò)轉(zhuǎn)染進(jìn)入人體內(nèi),是RNA干涉的中間產(chǎn)物。
19、 7. 結(jié)構(gòu)上, siRNA是雙鏈RNA。
20、 8. 在Dicer酶的加工過(guò)程中, siRNA對(duì)稱地來(lái)源于雙鏈RNA的前體的兩側(cè)臂。
21、 9. 在作用位置上, siRNA可作用于mRNA的任何部位。
22、 10. 在作用方式上, siRNA只能導(dǎo)致靶標(biāo)基因的降解,即為轉(zhuǎn)錄水平后調(diào)控。
23、11.。
本文分享完畢,希望對(duì)大家有所幫助。
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