人體血液包含幾種不同的成分,包括血漿,紅細(xì)胞(RBC),白細(xì)胞(WBC)和血小板。其中,白細(xì)胞被分為許多亞類,每個亞類具有獨特的功能和特征,例如淋巴細(xì)胞,單核細(xì)胞,嗜中性粒細(xì)胞等。淋巴細(xì)胞進(jìn)一步細(xì)分為T淋巴細(xì)胞,B淋巴細(xì)胞和NK細(xì)胞。在進(jìn)行免疫學(xué)領(lǐng)域的研究中,區(qū)分和分離這些細(xì)胞的不同類型非常重要。
通常通過流式細(xì)胞術(shù)和熒光激活細(xì)胞分選(FACS)來區(qū)分不同的免疫細(xì)胞類型,這可以根據(jù)它們的大小,粒度和熒光來識別不同的細(xì)胞群。雖然單獨的大小和粒度無法區(qū)分具有相似物理參數(shù)的細(xì)胞,但不同類型的免疫細(xì)胞在細(xì)胞表面顯示出不同的免疫受體組合。例如,T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞分別表達(dá)CD3和CD19。因此,熒光鑒定免疫細(xì)胞依賴于使用針對不同受體的多種抗體對細(xì)胞染色。長期以來一直認(rèn)為,不使用這些抗體就不可能區(qū)分不同的免疫細(xì)胞類型。
但是,韓國基礎(chǔ)科學(xué)研究所的自組裝和復(fù)雜性中心的科學(xué)家所做的新穎突破性研究可能剛剛改變了這一情況。研究人員采用了面向多樣性的熒光文庫方法(DOFLA),利用與小鼠脾臟分離的B和T淋巴細(xì)胞篩選了10,000多種不同的熒光分子。由此,他們設(shè)法發(fā)現(xiàn)了一種新的熒光探針,該探針可以區(qū)分B淋巴細(xì)胞而不是T淋巴細(xì)胞,而無需細(xì)胞受體靶向抗體。
研究人員稱這種新探針CDgB為B淋巴細(xì)胞的綠色代表化合物。CDgB是一種親脂性分子,包含連接至烴鏈的熒光成分。由于CDgB既包含極性熒光基團(tuán)又包含烴尾基,這意味著游離的未結(jié)合CDgB染料分子在溶液中形成類似于膠束的聚集體,并顯示出低水平的背景熒光。但是,當(dāng)它們附著在細(xì)胞表面時,聚集體解離并導(dǎo)致熒光信號出現(xiàn)尖峰。另外,染料的親脂性意味著染料不與蛋白質(zhì)靶結(jié)合,而是直接定位在脂質(zhì)膜結(jié)構(gòu)上。研究人員稱,這是“報道這種細(xì)胞分化機(jī)制的第一個例子”。
CDgB能夠選擇性地將B淋巴細(xì)胞的細(xì)胞膜靶向于T淋巴細(xì)胞或NK細(xì)胞。研究人員試圖通過測試具有4至20個碳原子的各種烴鏈長度的分子的不同衍生物,來優(yōu)化CDgB的選擇性。發(fā)現(xiàn)具有14至18個碳的CDgB衍生物顯示出對B淋巴細(xì)胞的最高選擇性,而C18顯示出最佳結(jié)果。當(dāng)碳長度增加到20以上時,通過熒光來區(qū)分細(xì)胞變得更加困難。碳長度對選擇性至關(guān)重要,這一事實表明該機(jī)制取決于B淋巴細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞之間膜結(jié)構(gòu)的差異。
標(biāo)簽: B細(xì)胞
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