關(guān)于細(xì)胞凋亡流式分析,細(xì)胞凋亡流式圖分析這個(gè)問題很多朋友還不知道,今天小六來為大家解答以上的問題,現(xiàn)在讓我們一起來看看吧!
1、在二維散點(diǎn)圖上,PI 和 annexin V 分別是X和Y軸。
2、一般認(rèn)為PI單染的細(xì)胞是已經(jīng)死亡的細(xì)胞,annexin V 單染的細(xì)胞是凋亡早期的細(xì)胞,而雙染是凋亡中期的。
3、需要在散點(diǎn)圖上先畫出4個(gè)象限,位置根據(jù)無染色的陰性細(xì)胞先定出左下象限。
4、Annexin V是一種檢測細(xì)胞凋亡的試劑,在正常細(xì)胞中,磷脂酰絲氨酸只分布在細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè),細(xì)胞發(fā)生凋亡早期,膜磷脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。
5、擴(kuò)展資料:用標(biāo)記了FITC的AnnexinⅤ作為熒光探針,利用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡可檢測細(xì)胞凋亡的發(fā)生,正常細(xì)胞和早期凋亡細(xì)胞的細(xì)胞膜是完整的。
6、檢測annexin V-FITC單染的細(xì)胞并檢查FL1-FL2(或FL3)散點(diǎn)圖,保證在左上和右上象限內(nèi)沒有顆粒。
7、如果有顆粒出現(xiàn)在上端象限則說明有熒光滲漏;此時(shí)FL1的熒光被FL2 (或FL3)PMT檢測到了。
8、為了糾正這種現(xiàn)象,增加FL1漏到FL2(或FL3)熒光的補(bǔ)償%(這可能在1-5%之間)。
9、如果這個(gè)調(diào)節(jié)沒有有效地去除FL2的陽性信號,此時(shí)要降低FL2(或FL3) PMT的電壓。
10、參考資料來源:百度百科-Annexin V。
本文分享完畢,希望對大家有所幫助。
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