導讀 關于cas9基因編輯原理,基因編輯技術原理這個問題很多朋友還不知道,今天小六來為大家解答以上的問題,現在讓我們一起來看看吧!1、基本原
關于cas9基因編輯原理,基因編輯技術原理這個問題很多朋友還不知道,今天小六來為大家解答以上的問題,現在讓我們一起來看看吧!
1、基本原理CRISPR簇是一個廣泛存在于細菌和古生菌基因組中的特殊DNA重復序列家族,其序列由一個前導區(qū)(Leader)、多個短而高度保守的重復序列區(qū)(Repeat)和多個間隔區(qū)(Spacer)組成。
2、前導區(qū)一般位于CRISPR簇上游,是富含AT長度為300~500bp的區(qū)域,被認為可能是CRISPR簇的啟動子序列。
3、重復序列區(qū)長度為21~48bp,含有回文序列,可形成發(fā)卡結構。
4、重復序列之間被長度為26~72bp的間隔區(qū)隔開。
5、Spacer區(qū)域由俘獲的外源DNA組成,類似免疫記憶,當含有同樣序列的外源DNA入侵時,可被細菌機體識別,并進行剪切使之表達沉默,達到保護自身安全的目的。
6、工作原理當細菌抵御噬菌體等外源DNA入侵時,在前導區(qū)的調控下,CRISPR被轉錄為長得RNA前體(Pre RISPR RNA,pre-crRNA),然后加工成一系列短的含有保守重復序列和間隔區(qū)的成熟crRNA,最終識別并結合到與其互補的外源DNA序列上發(fā)揮剪切作用。
7、目前發(fā)現的CRISPR/Cas系統(tǒng)有三種不同類型即I型、II型和III型,它們存在于大約40%已測序的真細菌和90%已測序的古細菌中。
8、其中II型的組成較為簡單,以Cas9蛋白以及向導RNA(gRNA)為核心組成,也是目前研究中最深入的類型。
本文分享完畢,希望對大家有所幫助。
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